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Applications

Microscopie à deux photons

La microscopie non-linéaire à deux photons, parfois appelée microscopie multi-photon, est une technique basée sur la fluorescence qui permet l’imagerie d’échantillons biologiques vivants particulièrement dans le domaine de la neuroscience. Contrairement à la microscopie confocale linéaire, un microscope non-linéaire excite la fluorescence seulement au point focal d’un laser femtoseconde infrarouge où l’intensité est suffisamment élevée pour permettre à une molécule colorante d’absorber deux photons infrarouge simultanément, comme si un seul photon d’énergie plus élevée était arrivé. Une image en trois dimensions est acquise en scannant le point focal en trois dimensions. La microscopie à deux photons a les avantages supplémentaires de réduire les interférences de bruit de fond permettant une plus haute résolution et une réduction de la détérioration photo-induite de l’échantillon.

Le laser le plus souvent utilisé pour la microscopie à deux photons est un laser femtoseconde infrarouge. Le taux de répétition de ce laser est typiquement de l’ordre de 80 MHz. Mais récemment, il a été démontré que des taux de répétition plus élevés, de l’ordre de 1 GHz, ont des avantages car ils réduisent la décoloration et la détérioration de l’échantillon en utilisant de moins fortes puissances tout en maintenant la même qualité d’image que pour un laser à 80 MHz. Cela est directement lié aux règles qui régissent les différents procédés impliqués dans la microscopie à deux photons. L’échelle de l’intensité de la fluorescence est quadratique à l’intensité d’éclairage tandis que la détérioration augmente avec un exposant de 2.5 et la décoloration augmente avec un exposant cubique. Le rapide taux de répétition offert par le taccor de Laser Quantum permet donc une augmentation significative du temps d’observation d’une cellule étudiée avant qu’elle ne soit fatalement endommagée.

Laser Quantum offre une gamme de lasers adaptés à la microscopie à deux photons. Le laser ultrarapide taccor fonctionne à un taux de répétition de 1 GHz. Cela diminue la détérioration d’un échantillon par un facteur de 2.5 et réduit la décoloration permettant des mesures répétées de haute qualité et, comme de récentes études montrent, 5 à 10 fois plus de temps de mesure.

  • taccor – Laser femtoseconde clé en main avec un taux de répétition de 1 GHz et des impulsions de 15 fs
  • gecco - 84 MHz laser
  • gigajet – Oscillateur GHz ultrarapide (333 MHz, 500 MHz or 1 GHz)

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